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本试剂盒适合于一抗为兔IgG来源的免疫组化实验.，FITC荧光检测。

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin-Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。

• 如经常使用，可将封闭液，稀释液和抗荧光衰减封片剂存放于2～8℃以方便使用。
  
• 如果背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01%～0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2～7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。

• 以石蜡切片热修复为例：
  
  • 切片常规脱蜡至水。
    
  • 可选步聚：
    
    • 热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液(pH6.0)，电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5～10min后，反复1～2次。冷却后PBS(pH7.2～7.4)洗涤1～2次。
      
    • 酶消化，滴加消化液，37℃10min，PBS(pH7.2～7.4)洗涤2～3次。
      
    • 跳过此步，直接进入下一步。
  • 滴加5% BSA封闭液，室温20分钟。甩去多余液体，免洗。
    
  • 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。
    滴加稀释的一抗，37℃孵育1h左右或20℃ 2h左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2～7.4)洗涤3次，每次2min(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
    
  • 根据使用量，用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1mL稀释液加入10μL Bio-羊抗兔IgG浓缩液，混匀即成工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗兔IgG工作液，20～37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2～7.4)洗涤3次，每次2min。
    
  • 根据使用量，用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1mL稀释液加入10μL SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液，20～37℃孵育30min(避光)。PBS(pH7.2～7.4)洗涤4次，每次5min。
    
  • 滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
• 对于细胞爬片：固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Triton X-100室温孵育20min，PBS漂洗两次，接上述第3步。
  
• 对于冰冻切片：固定后，PBS漂洗两次，再接上述第2步。